細(xì)胞培養(yǎng)瓶是實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間細(xì)胞培養(yǎng)、大量細(xì)胞擴(kuò)增和防污染的最適培養(yǎng)器皿。細(xì)胞培養(yǎng)瓶可方便、安全地處理細(xì)胞，確保實(shí)驗(yàn)流程安全進(jìn)行。

細(xì)胞培養(yǎng)瓶的材質(zhì)可分為玻璃的和塑料(聚丙乙烯)，玻璃的瓶子表面是親水的，細(xì)胞貼壁效果好，而塑料材質(zhì)的瓶子需要經(jīng)過(guò)表面的改性處理后才能支持細(xì)胞貼壁培養(yǎng)。

細(xì)胞培養(yǎng)瓶的貼壁效果可分為表面改性處理和未表面處理，聚苯乙烯(PS)表面是憎水的，一次性細(xì)胞培養(yǎng)皿等標(biāo)明Tissue culture treated是表示該器皿經(jīng)過(guò)表面的改性處理，適合貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。

細(xì)胞培養(yǎng)瓶的蓋子可分為密閉蓋、聚酯蓋、透氣蓋(強(qiáng)烈推薦)、隔墊蓋等。

細(xì)胞培養(yǎng)瓶的瓶頸也有多種樣式，有直頸、斜頸、角度頸、三角形、矩形。

細(xì)胞培養(yǎng)瓶的底部可分為正方形、長(zhǎng)方形、三角形等，根據(jù)細(xì)胞貼壁面積又可以分為25～175cm2多種。

（1）關(guān)于蓋子

一次性細(xì)胞培養(yǎng)瓶的蓋子不要擰得太緊，以保證氣體交換。HEPES是一種非離子緩沖液，在pH 7.2-7.4范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力，但是非常昂貴，在高濃度時(shí)對(duì)一些細(xì)胞可能有毒。

HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉（0.34g/L）共用，以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加。在這種培養(yǎng)條件下，一次性細(xì)胞培養(yǎng)瓶的蓋子應(yīng)擰緊，以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中。大多數(shù)培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH指示劑，酸性培養(yǎng)液呈橙黃色，堿性培養(yǎng)液呈深紅色。

（2）降低“生長(zhǎng)空洞”

多數(shù)用戶使用的不是的預(yù)包被一次性細(xì)胞培養(yǎng)瓶，而是普通的一次性細(xì)胞培養(yǎng)瓶，其表面環(huán)境并不利于無(wú)血清培養(yǎng)環(huán)境下的間充質(zhì)干細(xì)胞貼壁。37℃放置5-10分鐘，可讓培養(yǎng)基中的促貼壁物質(zhì)更好地與一次性細(xì)胞培養(yǎng)瓶底部結(jié)合，使得間充質(zhì)干細(xì)胞的貼壁能力增強(qiáng)，降低“生長(zhǎng)空洞”出現(xiàn)的概率。

（3）細(xì)胞消化

將瓶子豎立放置，吸走培養(yǎng)基，如果培養(yǎng)基中的脫落細(xì)胞較多，說(shuō)明細(xì)胞現(xiàn)在很容易脫落，只要加入1ml的PBS+EDTA(0.02%)，來(lái)回輕微晃動(dòng)培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞完全脫落，加入10mlMEM，混勻，不能吹打，分裝2瓶。

如果細(xì)胞沒(méi)長(zhǎng)滿就脫落，則只需加入5mlMEM，不分裝。

如果瓶中的細(xì)胞貼壁較牢固，培養(yǎng)基上清沒(méi)有細(xì)胞脫落碎片，且細(xì)胞長(zhǎng)滿達(dá)到80%以上，吸走培養(yǎng)基，加入5ml的PBS+EDTA(0.02%)，迅速輕微晃動(dòng)，豎立培養(yǎng)瓶，吸走，加入1ml0.05%胰酶，37度消化不超過(guò)3min，細(xì)胞完全消化脫壁，取出加入10ml培養(yǎng)基輕微吸打混勻，分裝2瓶。

細(xì)胞對(duì)于生長(zhǎng)環(huán)境非常敏感，細(xì)胞培養(yǎng)瓶作為一種較為常用的耗材，在操作時(shí)更要謹(jǐn)慎，嚴(yán)格按照規(guī)定流程進(jìn)行，避免因操作不當(dāng)影響細(xì)胞生長(zhǎng)。

一般在實(shí)驗(yàn)室使用較多。